制備液相色譜儀是以液體作為流動相的色譜分離方法,儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
流動相具有運(yùn)載樣品分子和選擇性分離的雙重作用,適用于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的大分子化合物(常溫進(jìn)樣不破壞藥物中的大分子化合物)色譜柱類型,流動相比例,操作參數(shù)(柱溫,流動相梯度)可優(yōu)化分離效果。
制備液相色譜進(jìn)樣針使用后要用純水或丙酮進(jìn)行清洗,對用于清洗液相進(jìn)樣針的溶劑,要考慮對殘留物質(zhì)使用過的樣品等所具有的溶解力、通常被使用的有純水或甲醇·BINGTONG等。在進(jìn)行空氣干燥后做保管。具體清洗步驟如下:
1、用溫水和非堿性·無磷的洗滌劑清洗;
2、用純水或BINGTONG等的溶劑進(jìn)行抽取推出、進(jìn)行短時間的清洗;
3、用純水或BINGTONG等的溶劑進(jìn)行抽取推出、進(jìn)行短時間的清洗;
4、用空氣進(jìn)行干燥。